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酶標板的選購要注意哪些方面

更新時間:2022-11-07      點擊次數(shù):2157
  在酶聯(lián)免疫吸附試驗中, 參與免疫學(xué)反應(yīng)的抗原去突破、抗體深入實施、標記抗體或抗原的純度至關重要、濃度和比例;緩沖液種類效果、濃度和離子強度有所應、pH值和反應(yīng)溫度、時間等條件起著關(guān)鍵作用合作關系。此外,作為載體的固相聚苯乙烯表面對抗原著力提升、抗體或抗原抗體復(fù)合物的吸附也起著重要作用。
  酶標板一般要比細胞培養(yǎng)板貴傳遞,細胞板主要做細胞培養(yǎng)融合,也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應(yīng)板相關性,一般不用做細胞培養(yǎng)完成的事情,它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測物聯與互聯,需要更高的要求和特定的酶標工作液。
  一:根據(jù)酶標板底部的不同進入當下,可以分為平底紮實、U型底、V型底
  平底的折射率低新體系,適于在酶標儀檢測投入力度;U型底的酶標板折射率較高,方便加樣不難發現、吸樣貢獻法治、混勻等操作,可以不用放在酶標儀上空間載體,直接通過目測觀察顏色變化情況高質量,從而判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)。V底的酶標板可以精確的吸取樣品重要組成部分。
  二:根據(jù)酶標板與蛋白和其它分子結(jié)合能力的不同流程,分為高結(jié)合力、中結(jié)合力和氨基化
  高結(jié)合力:表面經(jīng)處理后勃勃生機,其蛋白結(jié)合能力大大增強助力各業,可達300~400ngIgG/cm2,主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD提供有力支撐。使用該類酶標板可提高敏感性應用,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)品率∠嘭炌??乖蚩贵w包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位積極影響,需使用蛋白作為封閉劑自動化方案。
  中結(jié)合力:經(jīng)表面疏水鍵被動與蛋白結(jié)合,適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體重要手段,其蛋白結(jié)合能力為200~300ng IgG/cm2互動講。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體像一棵樹,可降低潛在的非特異性交叉反應(yīng)。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液去突破。
  氨基化:經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基能運用,其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體智能設備。使用合適的緩沖液和pH值不可缺少,其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結(jié)合的能力,可用于固定溶于Triton-100積極回應、Tween 20等去污劑的蛋白分子重要性。該類板的缺陷為由于降低了疏水性,一部分蛋白分子無法結(jié)合;此外多種場景,其表面需有效地封閉多元化服務體系。由于親水和共價的表面特性,使用的封閉液必須能夠與非反應(yīng)性氨基基團和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團發(fā)生作用先進水平。
  三:根據(jù)顏色分為透明便利性、黑色、白色
  透明的是常用的重要平臺,用于最一般的酶聯(lián)免疫實驗深刻認識。相對于透明的的板子,還有用于發(fā)光檢測用的不透明的板子應用提升,一般有黑色和白色兩種主動性。黑色的酶標板自身會有光吸收,所以它的信號相對于白色的板子要低很多發展的關鍵,因此一般用于檢測較強的光道路,如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測帶動產業發展,常用于一般的化學(xué)發(fā)光責任製。另外黑色的酶標板還可以消弱非特異反應(yīng)帶來的問題。有些客戶會問倍增效應,用一般的酶標板可不可以進行發(fā)光檢測規則製定,回答是不可以的,因為一般從化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中發(fā)射出的光是各向同性的優化服務策略,也就是說各個方向上同等發(fā)射出來的關規定。如果用透明的板子,光不僅會從垂直方向發(fā)散兩個角度入手,還從水平方向發(fā)散出來建強保護。很容易的就會通過各個孔之間的間隙和孔壁。這樣的話生產效率,光較強時相鄰孔之間的影響就會很大使命責任,因此不能用透明的酶標板來進行化學(xué)發(fā)光實驗。